液相色谱仪的工作过程简析

液相色谱仪的工作过程为：高压泵将贮液器(或槽、罐)中的流动相溶剂经进样器送入色谱柱，然后从控制器的出口流出(通常要回收)。当注入待测样品时，流经进样器的流动相将样品各组分带入色谱柱中进行分离，分离后的各组分依一定的顺序进入检测器，检测器产生的信号由记录仪记录下来，***后形成液相色谱图。 

1高压输液泵 

这是HPLC仪器中的着急部件之一。它一般由贮液器、高压输液泵、过滤器等组成。高压输液泵应该具备密封性好、输出流量恒定、压力平稳、可调范围宽、便于更换溶剂及耐腐蚀等条件。常用的输液泵有恒流泵和恒压泵两种，而恒流泵用的较多(因为它的输出流量能始终保持恒定，与色谱柱引起的阻力大小无关)，而恒压泵用的较少。恒流泵又分为机械***泵和机械往复泵，后者用的***多。 

2进样系统 

由于HPLC色谱柱比GC色谱柱短的多(约5～30cm)，所以，引起色谱峰峰形变宽的因素以柱外因素为主(即：进样系统、连接管道及检测器中存在的死体积)。而柱外展宽(色谱柱外因素引起的峰形变宽)又分柱前和柱后展宽，以进样系统所引起的柱前展宽为主要因素。 

3分离系统 

色谱柱是其核心部件之一。通常用φ4～5mm，5～30cm长度的不锈钢管作高压色谱柱，内装5～10μm的全多孔型微粒固定相。

4检测系统 

用于液相色谱仪的检测器有两类，一类是溶质型检测器，它仅对被测组分的物理或化学特性有响应，属于此类的有：紫外、荧光及电化学检测器等。另一类是总体检测器，它是对试样及洗脱液总的物理或化学性质有响应，属于此类的有： 示差折光、电导等检测器。在实际工作中, 应根据具体情况来选择适宜的检测器。而在HPLC仪器的常规分析中，紫外检测器用的***多。 除了这四大部分之外，还有一些附属的(有的甚至是不可缺少的)部件，如：脱气、梯度淋洗、自动进样、恒温、馏分收集及数据处理等装置。

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